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磁珠全血基因DNA提取試劑盒操作和儲存的注意事項

  • 發布日期:2017-12-09      瀏覽次數:3592
    • 磁珠全血基因DNA提取試劑盒根據全血特點采用幾個快速步驟提取基因組DNA,首先紅細胞裂解液裂解去除不含DNA的紅細胞,細胞核裂解液裂解白細胞釋放出基因組DNA,然后蛋白沉淀液選擇性沉淀去除蛋白,zui后純凈的基因組DNA通過異丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液,操作步驟簡單,實驗成本低,產量高,純度好,適合各種下游實驗。
      磁珠全血基因DNA提取試劑盒產品特點:
      1.從十幾個配方中優選出的紅細胞裂解液配方,裂解快速*。
      2.不需要使用有毒的苯酚等試劑。
      3.快速,簡捷,單個樣品操作一般可在60分鐘內完成。
      4.結果穩定,產量高(典型的產量3ml全血可提取出50-150µg),OD260/OD280典型的比值達1.7——1.9,長度可達50Kb-150kb,可直接用于構建文庫、PCR、Southern-blot和各種酶切反應。
      磁珠全血基因DNA提取試劑盒注意事項:
      1.所有的離心步驟均在室溫完成,使用轉速可以達到2500 x g, 4000rpm以上,并配備容納15ml離心管轉頭的傳統臺式離心機。
      2.如果實驗室有50ml轉頭的臺式或立式離心機,建議采用PP材質,可高溫高壓滅菌,50ml直口圓底離心管,不用擰螺旋蓋,方便開蓋,在本實驗中,直口圓底離心管方便清洗,經過多次漂洗消毒滅菌,可重復使用,降低實驗成本。
      3.用戶需自備異丙醇和70%乙醇。
      4.典型的產量3ml全血可提取出50-150µg 基因組DNA(不同樣品尤其疾病樣品中白細胞數量差異可能非常大,因此產量的個體差異也可能非常大)。
      5.溶液型全血基因組DNA提取方法,可以很容易的按照比例擴大或者縮小每次處理的全血量(100µl-20ml),需要具體產品操作說明,請索取不同處理量的操作手冊。
      6.磁珠全血基因DNA提取試劑盒可運用于多種抗凝劑的全血,如EDTA、檸檬酸、肝素抗凝血。其中由于肝素抗凝血的白細胞沉淀團很難打散重懸,影響裂解效果,建議選用非肝素的抗凝劑收集血液標本。
      7.為了*效果,使用新鮮血液標本或者4℃存放小于3天的標本,不要使用反復凍融超過3次的標本,否則會嚴重降低產量。
      磁珠全血基因DNA提取試劑盒適用于快速提取各種動物全血基因組DNA。
      磁珠全血基因DNA提取試劑盒儲存事項:
      1.環境溫度低時細胞核裂解液中某些去污劑成份會析出出現渾濁或者沉淀,可在37℃水浴加熱幾分鐘,即可恢復澄清,不要劇烈搖晃,以免形成過量的泡沫。
      2.蛋白沉淀液可能出現析出和沉淀,可以在37℃水浴幾分鐘幫助重新溶解,如果不能*溶解,也不影響使用效果,直接取用上層溶液即可。
      3.避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發、氧化、pH值變化,各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。
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